metabolisme bakteri

Metabolisme Bakteri Metabolisme : semua reaksi kimia yang terjadi dalam organisme hidup untuk memperoleh dan menggunakan energi, sehingga organisme dapat melaksanakan berbagai fungsi hidup. Metabolisme terdiri dari dua proses yang berlawanan yang terjadi secara simultan. Reaksi tersebut adalah: 1. Sintesis protoplasma dan penggunaan energi yang disebut sebagai Anabolisme. 2. Oksidasi substrat diiringi dengan terbentuknya energi disebut dengan Katabolisme. Bakteri memperoleh energi melalui proses oksidasi-reduksi. Oksidasi adalah proses pelepasan elektron sedang reduksi adalah proses penangkapan elektron. Karena elektron tidak dapat berada dalam bentuk bebas, maka setiap reaksi oksidasi selalu diiringi oleh reaksi reduksi. Hasil dari reaksi oksidasi energi. Reaksi oksidasi dikatalisis : enzim dehidrogenase transfer elektron dan proton yang dibebaskan kepada aseptor elektron intermedier seperti NAD+ dan NADP+ NADH dan NADPH. Fosforilasi oksidasi terjadi pada saat elektron yang mengandung energi tinggi tersebut ditransfer ke dalam serangkaian transpor elektron sampai akhirnya di tangkap oleh oksingen atau oksidan anorganik lainnya sehingga oksigen akan tereduksi menjadi H2O. Berbagai carier yang mentransfer elektron menuju O2 : flavoprotein,quinon maupun citekrom. Ada dua macam energi yang digunakan oleh makhluk hidup. 1. Sinar matahari. Organismenya disebut dengan organisme fotosintesis atau di kenal juga dengan organisma fototrofik. 2. Oksidasi senyawa kimia. Organismenya disebut dengan organisme kemosintesis kemotrofik atau autotrofik. Fotosintesis ada 2 macam : Fotosintesis tipe Cyanobacteria. sama dengan fotosintesis yang terjadi pada tanaman tingkat tinggi. CO2 + 2H2O ……sinar matahari…… H2O + [ CH2O ]n + O2 Klorofil dimana pada sistem fotosintesis ini terdapat 2 fotosistem yaitu fotosistem (PS) I dan II. Aliran elektron dari PS II ke PS I mengubah NADP+ menjadi NADPH. Aliran eletktron yang demikian dikatakan noncyelic phosphorilation. Fotosintesis tipe Noncyanobacteria. tidak memiliki fotosistim II untuk menfotolisis H2O tidak pernah menggunakan air sebagai reduktan sehingga oksigen tidak pernah di hasilkan dari fotosintesis dikenal dengan fotosintesis anaerob memerlukan suplai senyawa organik sebagai donor hidrogennya. Sinar matahari CO2 +2H2A……………………….H2O + [CH2O]n + 2A Klorofil Berdasarkan tipe pada reduktan dan pigmen fotosintesisnya, bakteri ini dibagi menjadi 3 : Chlorobiceae. Disebut juga dengan green-sulfur bacteria. Bakteri ini juga menggunakan hidrogen dan beberapa senyawa mengandung sulfat sebagai reduktannya. Sinar matahari a. CO2 + 2H2……………………….. CH2O + H2O b. CO2 + 2H2S ………………….. CH2O + H2O + 2 S c. 3CO2 + 2S + 5H2O ………………. 3 CH2O + 2H2SO2 d. 2CO2 + Na2S2O3 + 3H2O ……………….. 2CH2O + Na2SO4 2. Chromaticeae. Pada prinsipnya sama dengan Chomaticeae tetapi pigmen yang dimilikinya tidak hijau melainkan merah – jingga disebut dengan purple- sulfur- bacteria. 3. Rhodospirillaceae. Bakteri ini menggunakan hidrogen dan berbagai senyawa organik sebagai reduktan . contoh: Rhodospirillum, Rhodopseudomonas. Sinar mathari CO2 + 2CH3CHOHCOOH …………………….CH2O + H2O + 2CH3COCOOH Hanya dapat berlangsung dalam keadaan anoerob. Akan tetapi ada beberapa anggota Rhodospirillaceae mampu melakukan pertumbuhan nonfotosintesik dengan adanya oksingen apabila media mengandung cukup nutisi untuk tumbuh. Chemotrofik atau Autotrofik Organisme CO2 digunakan sebagai sumber karbon. Diperlukan energi dan NADPH untuk mengubah CO2 menjadi material sel. METABOLISME FUNGI Metabolisme Karbon Berdasarkan kemampuan untuk memperoleh energi dari sumber karbon organisme dibedakan atas: a). Autotrof : memiliki kemampuan mengasimilasi karbon anorganik (misal CO2, CO3), atau senyawa dengan satu karbon (misalnya CH4) karbon organik. - Dengan bantuan cahaya matahari : Fotoautotrof - Dengan bantuan oksidasi senyawa anorganik : Kemoautotrof b). Heterotrof : memiliki kemampuan mengasimilasi karbon organik karbon organik lain. - Dengan bantuan cahaya matahari : Fotoheterotrof - Dengan bantuan oksidasi senyawa organik : Kemoheterotrof. Fungi : mikroorganisme heterotrof karena tidak memiliki kemampuan untuk mengoksidasi senyawa karbon anorganik, atau senyawa karbon yang memiliki satu karbon. Senyawa karbon organik membuat materi sel baru berkisar dari molekul sederhana seperti gula sederhana, asam organik, gula terikat alcohol, polimer rantai pendek dan rantai panjang mengandung karbon, hingga kepada senyawa kompleks seperti karbohidrat, protein, lipid dan asam nukleat (Gadd, 1988; Madigan et al., 2002). A.1. Metabolisme Karbohidrat Karbohidrat dan derivat : substrat utama untuk metabolism. 2 peranan penting : Karbohidrat dapat dioksidasi menjadi energi kimia yang tersedia di dalam sel dalam bentuk ATP dan nukleotida phosphopyridine tereduksi Karbohidrat menyediakan hampir semua karbon yang diperlukan untuk asimilasi konstituen sel fungi yang mengandung karbohidrat, lipid, protein, dan asam nukleat. Tahap awal : Tahap transfor, kecuali untuk di- atau trisakarida yang harus dihidrolisis terlebih dahulu di luar sel. Transpor monosakarida melalui membran dilakukan oleh suatu protein transport spesifik, yaitu permease. Sebagian besar fungi dapat memanfaatkan monosakarida, sedikit di-, oligo dan poli karena tidak memiliki kemampuan untuk menghidrolisis molekul-molekul besar tersebut. A.2. Metabolisme Protein Fungi berfilamen : menguraikan protein; khamir jarang menggunakan protein. Skema : Fungi menguraikan protein dan menggunakannya sebagai sumber nitrogen dan karbon (aktivitas enzim proteolitik/protease)sekresi protease ke lingkungan menguraikan protein menjadi asam-asam amino hasil diangkut ke dalam sel (sistem transpor). A.3. Metabolisme Lipid Digunakan dalam bentuk : lemak dan minyak sebagai sumber karbon. Enzim yang diperlukan untuk menghidrolisis : Lipase (triacylglycerol acylhydrolase) mengubah menjadi diasilgliserol, monoasilgliserol, gliserol atau asam lemak. Berdasarkan lokasi pemutusan ikatan gliserol pada triasilgliserol, dibedakan menjadi 2 yaitu : Lipase non-spesifik : memutus ikatan gliserol dari triasilgliserol pada tiga posisi menghasilkan diasilgliserol, monoasilgliserol atau 3 molekul asam lemak dan gliserol. Lipase spesifik : memutus ikatan gliserol dari triasilgliserol pada posisi satu dan tiga sehingga menghasilkan 1,2-diasilgliserol dan 2-monoasilgliserol. Beberapa fungi yang menggunakan lipid dengan memanfaatkan kerja lipase : C. cylindracea C. deformans C. curvata C. rugosa C. caseicolum P. chrysogenum P. citrinum P. cyclopium P. simplicissimum P. roquefortii Mucor miehei Rhizopus delemar Rhizopus japonicus Rhizopus oligosporus Materi organik didegradasi oleh lipase lipase disekresi ke lingkungan (sebelum diangkut ke dalam sel). A.4. Metabolisme Asam Nukleat Slaughter (1988) Fungi berfilamen mengkatabolisme purin. Beberapa fungi yang memanfaatkan hipoxanthin, xanthin, asam urat dan adenine sebagai nitrogen : A. nidulans P. chrysogenum Fusarium moniliforme Saccharomyces cerevisiae menggunakan allantoin sebagai sumber nitrogen. Metabolisme Nitrogen B.1. Kemampuan Fungi Menggunakan Nitrogen Anorganik Slaughter (1988) : “Semua mikroorganisme yang telah diteliti tampaknya dapat menggunakan ammonia sebagai sumber nitrogen anorganik. Asimilasi nitrat pada khamir dan kapang menggunakan proses yang sama : nitrat ditranspor ke dalam sel diubah menjadi amonium oleh enzim nitrat reduktase dan nitrit reduktase. Nitrat reduktase : protein yang memerlukan kofaktor molibdopterin, haem-Fe dan FAD. Fungi yang dapat menggunakan nitrat sebagai sumber nitrogen: A. nidulans C. utilis Hansenula anomala Hansenula polymorpha (sinonim : Pichia angusta) Nitrit bersifat toksik bagi sebagian besar fungi, tetapi beberapa fungi dapat menggunakannya sebagai sumber nitrogen selama konsentrasi yang digunakan cukup rendah. Enzim nitrit reduktase mereduksi nitrit menjadi amonium dan memiliki ferredoksin, 2 kelompok protetik dan FAD. Aspergillus nidulans dan Hansenula polymorpha dapat menggunakan nitrit Saccharomyces dan Zygosaccharomyces tidak dapat menggunakan nitrat dan nitrit sebagai sumber nitrogen. B.2. Kemampuan Fungi Menggunakan Nitrogen Organik Slaughter (1988) : sebagian besar fungi dapat tumbuh baik dalam medium yang mengandung glutamin, asparagin, dan arginin; diikuti dengan asam glutamat, asam aspartat dan alanin. Metabolisme Senyawa Lain Fungi dapat menghidrolisis senyawa-senyawa toksik yang sulit diuraikan menjadi senyawa-senyawa yang lebih sederhana dapat dimanfaatkan oleh mikroorganisme itu sendiri atau lainnya. Contoh : Fenol dan derivatnya dapat dimanfaatkan sebagai sumber karbon dan energi oleh : Aspergillus Candida Cladosporium Fusarium Monicillium Trichoderma Penicillium Pleurotus Phanerochaete Perbedaan antara Prokariot (Bakteri) dan Eukariot (Fungi) Kesimpulan : Metabolisme Fungi lebih kompleks daripada bakteri, karena fungi merupakan mikroorganisme eukariotik yang sangat bervariasi kemampuan memanfaatkan nutrien dari lingkungan dan kemampuan metabolisme yang dimiliki oleh fungi juga sangat bervariasi. Hingga saat ini masih banyak yang belum diketahui mengenai kemampuan metabolisme fungi, dan perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengetahui sistem metabolisme fungi secara keseluruhan. Fungi dan bakteri sama-sama memanfaatkan nutrien dari lingkungan sebagai sumber untuk bahan metabolismenya, serta metabolisme yang dilakukan meliputi (anabolisme dan katabolisme). REFERENSI Gandjar, Wellyzar, dan Ariyanti. 2006. Dasar Dan Terapan Mikologi. Yayasan Obor Indonesia : Jakarta. Priani, N. 2003. Metabolisme Bakteri. http://www.google.co.id. [Diakses pada tanggal : 17 agustus 2010]. Sumarsih, S. 2003. Diktat Kuliah Mikrobiologi Dasar. http://www.google.co.id. [Diakses pada tanggal : 17 agustus 2010]. METABOLISME PROTEIN Nama protein pertama kali diusulkan oleh ahli kimia Swedia, Berzelius. Protein berasal dari bahasa Yunani, protios, yang berarti bahan penyokong yang pertama. • Protein merupakan komponen utama dalam semua sel hidup. • Fungsi utamanya sebagai unsur pembentuk styruktur sel, misalnya dalam rambut, wol, kolagen, jaringan penghubung, membran sel dan lain-lain. • Selain itu dapat pula berfungsi sebagai protein yang aktif seperti enzim yang berperan sebagai katalisator segala proses biokimia dalam sel. • Protein aktif selain enzim yaitu hormon, hemoglobin, protein yang terikat pada gen, toksin, anti bodi atau anti gen dan lain-lain. Protein adalah rangkaian atau polimer dari sejumlah asam amino. Asam amino adalah molekul organik kecil yang pada umumnya terbuat dari karbon, hidrogen, oksigen, dan nitrogen. • Protein dibuat dari suatu pool yang terdiri dari 20 asam amino yang berbeda. • Ratusan atau ribuan asam amino dirangkai dengan suatu urutan tertentu untuk membentuk rantai asam amino. • Fungsi protein dimungkinkan karena struktur tiga dimensinya yang unik. • Dengan strukturnya yang unik suatu molekul protein dapat melakukan interaksi dengan molekul lainnya sehinnga dapat berfungsi sebagai molekul pengatur dalam suatu ekspresi gen atau transmisi genetik menjadi fenotipik. • Jadi, suatu protein sangat tergantung pada kemampuannya untuk mengikat atau berpasangan dengan molekul lainnya untuk menjalankan fungsinya. • Kemampuan tersebut ditentukan oleh struktur tiga dimensinya. • Bila asam amino dirakit menjadi suatu rantai protein, rantai tersebut segera melipat membentuk suatu struktur yang secara energetik paling relaks atau yang bentuknya paling stabil. Bentuk yang secara energetik paling stabil ditentukan oleh interaksi tiap-tiap asam amino yang membentuk protein tersebut. • Oleh karena itu, jenis asam amino dan urutannya dalam rantai protein akan menentukan struktur tiga dimensi molekul protein yang terbentuk. • Urutan asam amino dalam suatu rantai protein sangat penting menentukan fungsi protein tersebut. • Dengan 20 macam asam amino yang berbeda, diperoleh jumlah dan urutan yang berbeda-beda sehingga dihasilkan protein-protein unik yang hampir tidak terbatas jumlahnya. • Keragamn ini sangat menguntungkan mengingat berbagai ragam fungsi yang dilakukan oleh protein. Semua organisme merupakan kumpulan dari sejumlah protein dan segala aktivitasnya. • Fungsi protein tergantung pada struktur tiga dimensinya, yang pada gilirannya ditentukan oleh sekuen asam amino penyusun protein tersebut. • Jadi, DNA menentukan karakteristik suatu organisme karena DNA menentukan sekuen asam amino dari semua protein pada suatu organisme. • DNA mengandung sandi genetik untuk tiap asam amino yang ditampilkan masing-masing dari sekuen tiga pasang basa. • Ketiga basa (triplet) ini disebut kodon. • Urutan kodon pada suatu sekuen DNA mencerminkan urutan asam amino yang akan dirakit menjadi suatu rantai protein. • Satu bagian sekuen DNA lengkap yang mampu menentukan sekuen asam amino suatu protein atau molekul r RNA dan tRNA disebut gen, yaitu satuan hereditas yang didefinisikan oleh para ahli genetika klasik. • Semua gen dan sekuen DNA yang dimiliki oleh suatu organisme disebut genom. Sintesis Protein Proses sintesis protein dari sandi genetik melibatkan beberapa langkah. DNA pada dasarnya adalah penyimpan informasi yang pasif, mirip denga cetak biru (blue print) untuk denah rumah. Aktivitas pembuatan protein terjadi pada suatu situs khusus dalam sel yang disebut ribosom. Oleh karena itu, langkah pertama dalam sintesis protein adalah menyampaikan informasi dari DNA ke ribossom. • Untuk melakukan hal ini enzim-enzim seluler membuat salinan kopi gen sehinnga dapat dibaca oleh ribosom. • Salinan kopi gen ini disebut RNA duta (messennger RNA = mRNA). mRNA membawa sandi genetik yang dipakai langsung untuk sintesis protein di ribosom. • Tahap ini disebut dengan tahp transkripsi. • Dalam tahap berikutnya kodon pada mRNA harus dapt dikorelasi dengan asam amino yang seharusnya. • Tahapan ini dilakukan molekul RNA lain, yaitu RNA transfer, (transfer RNA = tRNA) yang dikenal dengan tahap translasi. • Akhirnya asam amino harus disambungkan untuk membentuk rantai protein fungsional (tahap sintesis). • Ribosom yang terdiri dari RNA dan protein, melakukan fungsi tersebut. • Bila rantai protein sudah lengkap, suatu tanda berhenti (stop sign) mempengaruhi ribosom sehingga ribosom melepas protein baru tersebut ke dalam sel. Transkripsi. • Transkripsi adalah sintesis RNA secara enzimatik dengan menggunakan DAN sebagai cetakan. • Untuk transkripsi suatu gen, hanya salah satu rantai DNA yang digunakan sebagai cetakan atau templat. • Transkripsi dikatalis oleh enzim RNA polimerase. Sintesis RNA selalu bergerak ke satu arah, yaitu dari ujung 5’ ke ujung 3’ dari molekul RNA. • Untuk menginisiasi transkripsi, RNA polimerase berikatan pada suatu daerah di DNA yang disebut promoter. Promoter terletak disebelah hulu (ke arah5’) dari gen. • Perbedaan urutan nukleotida dari promoter berbagai gen menyebabkan perbedaan tingkat efisiensi dan regulasi dari inisiasi transkripsi gen-gen tersebut. • Setelah RNA polimerase terikat pada promoter DNA, kedua rantai DNA dipisahkan dan RNA polimerase memulai sintesis RNA di tempat inisiasi. • Tempat ini disebut sebagai posisi +1. RNA polimerase menambahkan ribonukleotida ke ujung 3’dari rantai RNA yang sedang disintesis. • Hal ini dilakukan dengan bergerak dari ujung 3’ ke arah 5’ dari rantai DNA cetakan., sambil memisahkan bagian rantai ganda DNA yang dilaluinya. • Dengan demikian ribonukleotida dapat berpasangan dengan DNA cetakan dan ditambahkan pada ujung 3’ RNA dengan pembentukan ikatan fosfodiester. • Heliks ganda akan terbentuk kembali setelah RNA polimerase lewat. Translasi. • Translasi merupakan proses sintesis protein di dalam sel. • Sebelum sintesis protein dimulaio, setiap jenis tRNA berikatan dengan asam amino spesifik. • Reaksi ini dikatalis oleh enzim aminoasil tRNA sintetase bersama dengan ATP, sehingga terbentuk aminoasil tRNA. • Pada tRNA terdapat antikodon yang akan berpasangan dengan kodon yang terdapat pada mRNA. Setiap macam aminoasil tRNA sintetase akan menggabungkan asam amino tertentu pada tRNA yang spesifik. • Pada tRNA inisiator, tRNA terikat pada asam amino metionin yang termodifikasi, yaitu N-formilinetionin. Proses sintesis protein terdiri dari tiga tahap yaitu: • Inisiasi : proses penempatan ribosom pada suatu molekul mRNA • Elongasi : proses penambahan asam amino • Terminasi : proses pelepasan protein yang baru disintesis • Pada sintesis protein sel prokariot, prosaes inisiasi memerlukan sub unit kecil (30S) dan sub unit besar (50S) ribosom, mRNA, tiga faktor inisiasi (IF1, IF2 dan IF3) dan GTP. IF1 dan IF3 mula-mula terikat pada sub unit kecil ribosom, kemudian IF2 dan GTP bergabung. • Kompleks sub unit kecil ini terikat pada mRNA di tempat pengikatan ribosom yang terletak 8 – 13 nukleotida sebelum hulu kodon inisiasi AUG kemudian bergerak sepanjang mRNA ke arah hilir sampai menemukan kodon inisiasi. • Setelah pengikatan sub unit kecil ribosom pada kodon inisiasi, tRNA inisiator dapat terikat pada kodon inisiasi dan melepaaskan IF3 sehingga terbentuk kompleks inisiasi 30S, melepaskan IF1, IF2, GDP dan fosfat sehingga terbentuk inisiasi 70S. • Proses elongasi melibatkan tiga faktor elongasi (EF – Tu, EF – Ts, EF – G0, GTR, aminoasil tRNA dan kompleks inisiasi 70 S. • Proses elongasi terdiri dari tiga tahap: 1. Aminoasil tRNA membentuk kompleks denagn EF-Tu dan GTP, terikat pada “A-site” di ribosom dengan melepaskan EF-Tu – GDP. EF-Tu – GTP dapat berubah lagi menjadi EF-Tu – GTP dengan bantuan EF-Ts dan GTP. 2. Enzim transferase peptidil yang terdapat pada ribosom membenyuk ikatan peptida antara dua asam amino yang berdampingan. 3. Enzim translokase (EF-G) dengan energi GTP menggerakkan ribosom sejauh satu kodon sepanjang mRNA sehingga tRNA pada “P-site” lepas dan tRNA pada “A-site” pindah ke “P-site”. • Proses elongasi rantai peptida berjalan terus sampai ribosom mencapai suatu kodon stop. • Proses terminasi melibatkan tiga faktor pelepas (“release faktor”, RF1, RF2 dan RF3). RF1 atau RF2 dapat mengenal kodon stop dan denagn bantuan RF3 menyebabkan trasnsferase peptidil melepaskan rantai polipeptida dari tRNA. • Faktor-faktor pelepas membantu pelepasan kedua sub unit ribosom dari mRNA. 2. Ciri-ciri Molekul Protein Beberapa ciri utama molekul protein yaitu: • Berat molekulnya besar, yang merupakan suatu makromolekul • Umumnya terdiri dari 20 macam asam amino, yang membentuk suatu rantai polipeptida yang berikatan satu dengan yang lain. • Ikatan peptida merupakan ikatan antara α-karboksil dari asam amino yang satu dengan gugus α-amino dari asam amino yang lainnya. • terdapatnya ikatan kimia yang lain yang menyebabkan terbentuknya lengkungan-lengkungan rantai polipeptida menjadi struktur tiga dimensi protein. • Sebagai contoh misalnya ikatan hidrogen dan ikatan hidrofob. • strukturnya tidak stabil terhadap beberapa faktor seperti pH, radiasi, temperatur, dan sebagainya • umumnya reaktif dan sangat spesifik, yang disebabkan terdapatnya gugus samping yang reaktif dan susunan khas struktur makromolekulnya.. • Beberapa gugus samping yang biasa terdapat diantaranya gugus kation, anion, hidroksil aromati, hdroksil alifatik, amin, amida, tiol, dan gugus heterosiklik Klasifikasi Asam Amino • Berdasarkan sifat kekutuban (polarity) gugus R, asam amino dibagi menjadi 4 golongan yaitu: 1. asam amino dengan gugus R yang tak mengutub. Golongan ini terdiri dari 5 asam amino yang mengandung gugus R alifatik (alanin, lesin, isolesin, valin, dan prolin), 2 dengan R aromatik (fenilalanin dan triptofan), dan 1 mengandung atom sulfur (metionin). 2. asam amino dengan gugus R mengutub tak bermuatan. Lebih mudah larut dalam air karena gugus R mengutub dapat membentuk ikatan hidrogen dengan molekul air. Kekutuban serin, treonin, dan tirosin disebabkan oleh gugus hdroksil, asparagin dan glutamin oleh gugus amida, dan sistein oleh gugus sulfhidril (-SH). 3. asam amino dengn gugus R bermuatan negatif (asam amino asam). Golongan ini bermuatan negatif pada pH 6,0-7,0 dan terdiri dari asam aspartat dan asam glutamat yang masing-masing mempunyai dua gugus karboksil. 4. asam amino dengan gugus r bermuatan positif (asam amino basa). Golongan asam amino ini bermuatan positif pada pH 7,0 yang terdiri dari lisin, arginin yang mengandung gugus basa lemah. Sifat Asam Basa Asam Amino • Di dalam larutan netral asam amino selalu ada dalam bentuk ion berkutub (zwtterion) yang dapat ditunjukkan dengan konstanta elektrik dan momen dwikutub yang tinggi karena adanya pemisahan muatan positif dan negatif dalam bentuk ion berdwikutub. • Semua asam amino yang didapat barasal dari hidrolisis protein kecuali glisin, memiliki sifat aktif optik yaitu dapat memutar bidang polarisasi cahaya bila diperiksa dengan polarimeter. • Reaksi khas asam amino disebabkan oleh adanya gugus α-karboksil, α-amino dan gugus yang terdapat pada rantai samping (R). Struktur dan Sifat Peptida • Peptida mengandung 2,4 atau 4 asam amino, sehingga dapat disebut dipeptida, tripeptida, dst. Peptida didapatkan dari hidrolisis rantai panjang protein. • Peptida mempunyai pH isoelektrik. • Reaksi kimia peptida disebabkan oleh adanya gugus ujung NH2 dan –COOH, dan gugus R yang dapat berionisasi. • Penamaan peptida didasarkan pada komponen asam aminonya. • Urutan dimulai dar rantai N-ujung. • Uji peptida ini dapat dilakukan dengan uji buret, yaitu reaksi yang terjadi antara peptida atau protein dengan CuSO4 dan alkali,yang menghasilkan warna ungu. • Pemisahan atau analisis peptisa biasa dikerjakan dengan kromatografi penukar –ion atau elekrtroforesis kertas. Analisis Asam Amino pada Peptida • Penentuan urutan asam amino dapat dlakukan dengan cara Hidrolisis sempurna. • Hidrolisis dengan HCl 6N pada suhu 100 -120 celcius selama 10 - 24 jam memeberikan hasil terbaik, kecuali pada triptopan yang mengalami kerusakan pada suasana asam kuat, juga gugus amida pada glutamin dan asparagin akan pecah menghasilkan asam glutamat, asam aspartat, dan ion amoninum. • Banyaknya amonia pada hidrolisat dapat ditentukan untuk mengetahui kadar amida yang terdapat pada protein. • Hidrolisis dengan alkali menyebabkan kerusakan pada sistein, sistin, serin dan treonin. • Penentuan urutan asam amino dalam Polipeptida didasarkan pada cara sanger untuk penentuan urutan asam amino dalam protein insulin yang bebas dari kontaminasi. Cara bertingkat yang dilakukan sebagai berikut: 1. Penentuan asam amino C-ujung dan asam amino N-ujung. 2. pemutusan rantai plipeptida menjadi fragmen peptida dengan rantai yang lebih pendek dengan enzim tripsin fragmen peptida. Kemudian fragmen tersebut dipisahkan satu dari yang lain dengan cara elektroforesis atau kromatografi. Tiap fragmen peptida dihidrolisis sempurna dan asam amino ditentukan. 3. asam amino C-ujung dan asam amino N-ujung tiap fragmen peptida yang didapat dari no 2 ditentukan, sehingga urutan asam amino tiap fragmen peptida (dipeptida atau tripeptida) dapat ditentukan. 4. fragmen peptida yang lebih panjang dari tripeptida, ditentukan urutan asam amino dengan cara edman, yaitu dengan pereaksi fenilisotisianat. 5. diambil polipeptida asal dan pemotongan rantai menjadi fragmen diulangi lagi, tetapi dengan mempergunakan enzim lain, misalnya kimotripsin atau pepsin. Kimotripsin menghidrolisis ikatan peptida yang gugus karboksilnya berasal dari asam amino fenilalanin, triptofan atau tirosin. Pepsin menghidrolisis ikatan peptida yang gugus aminonya berasal dari asam amino fenilalanin, triptofan, tirosin, lesin, asam aspartat, asam glutamat. 6. Dibandingkan komposisi asam amino dan asam amino N-ujung serta C-ujung dari fragmen yang dihasilkan kedua cara hidrolisis tersebut, maka urutan yang benar sisa asam amino dalam polipeptida asal dapat ditentukan. Organisasi struktur protein • Struktur tiga dimensi protein dapat dijelaskan dengan mempelajari tingkat organisasi struktur yaitu struktur primer, sekunder, tersier dan kuartener. 1. Struktur primer • Struktur primer protein ditentukan oleh ikatan kovalen antara residu asam amino yang berurutan yang membentuk ikatan peptida. • Struktur primer dapat digambarkan sebagai rumus bangun yang biasa ditulis untuk senyawa organik. • Untuk mengetahui struktur primer protein diperlukan cara penentuan bertingkat yaitu: 1. Penentuan jumlah rantai polipeptida yang berdiri sendiri dari protein 2. Pemutusan ikatan antara rantai polipeptida yang satu dengan lainnya. 3. Pemisahan masing-masing rantai polipeptida 4. Penentuan urutan asam amino dari masing-masing rantai polipeptida dengan cara sanger. 2. Struktur sekunder • Struktur ini terjadi karena ikatan hidrogen antara atom O dari gugus karbonil (C=O) dengan atom H dari gugus amino (N-H) dalam satu rantai pilipeptida,memungkinkan terbentuknya konfirasi spiral yang disebut Struktur helix. • Rantai paralel yang berkelok-kelok disebut konfirmasi –ß,rantai dihubung silangkan oleh ikatan hidrogen sehingga membentuk suatu struktur yang disebut lembaran berlipat-lipat. • Struktur polipeptida dalam protein serabut pada rambut dan wol berbentuk spiral yang berarah putar kekanan. Yang disebut dengan ð-helix,sedang yang berkelok-kelok disebut ß-kerotin. 3. Struktur tersier 1. Struktur tersier terbentuk karena terjadinya perlipatan (folding) rantai ð-helix,konformasi ß,maupun gulungan rambang suatu polipeptida,membentuk protein glubular,yang struktur tiga dimensinya lebih rumit daripada protein serabut. 2. Kemantapan struktur tersier suatu molekul protein selain disebabkan oleh ikatan kovalen seperti ikatan peptida dan ikatan disulfida juga oleh ikatan tak-kovalen yang menunjangnya yaitu yang menyebabkan terjadinya pelipatan tersebut. Struktur kuartener • Sebagian besar protein berbentuk globular yang mempunyai berat molekul lebih dari 50 ribu merupakan suatu obligomer,yang terjadi dari beberapa rantai polipeptida yang terpisah yang disebut juga dengan protomer yang saling mengadakan interaksi membentuk struktur kuartener dari proteina obligomer tersebut. JENIS ASAM AMINO • Alanine - The second simplest amino acid, but used the most in proteins. • beta-Alanine - The only naturally occurring beta amino acid. • Arginine - Amino acid often used at the active sites of enzymes. • Asparagine - Amide derivative of aspartic acid. • Aspartic Acid - Important intermediate in the citric acid cycle. • Carnitine - Unusual amino acid that carries fatty acids into mitochondria. • Citrulline - An amino acid that works to detoxify and eliminate unwanted ammonia. • Cysteine - Thiol containing amino acid involved in active sites and protein tertiary structure determination. • Cystine - Oxidation product of cysteine that holds proteins together. • gamma-Aminobutyric Acid - Decarboxylated amino acid that helps you chill out. • Glutamic Acid - Negatively charged amino acid found on the surface of proteins. • Glutamine - The only amino acid with the ability to easily cross the barrier between blood and brain tissue. • Glutathione - Small peptide that helps dump free radicals. • Glycine - Simplest amino acid that also acts as a neurotransmitter antagonist. • Histidine - Amino acid responsible for histamine biosynthesis. • Hydroxyproline - Important amino acid used in structural proteins like collagen. • Isoleucine - Hydrophobic amino acid used almost exclusively in protein and enzyme construction. • Leucine - Another hydrophobic amino acid used almost exclusively in protein and enzyme construction. • Lysine - An essential amino acid with a positive charge on the aliphatic side chain. • Methionine - An essential amino acid that helps initiate protein synthesis. • Ornithine - Critical member of the amino acids in the urea cycle. • Phenylalanine - Most common aromatic amino acid found in proteins. • Proline - Cyclic aliphatic amino acid used in the synthesis of collagen. • Serine - Amino acid alcohol found in the active site of serine proteases. • Taurine - Mercaptan-containing amino acid that is involved in bile acid biochemistry. • Threonine - Amino acid alcohol involved in porphyrin metabolism. • Tryptophan - Aromatic amino acid used the least frequently in proteins. • Tyrosine - Hydroxyphenyl amino acid that is used to build neurotransmitters and hormones. • Valine - Hydrophobic aliphatic amino acid used to hold proteins together. ASAM AMINO DAN PROTEIN Protein merupakan makromolekul yang mengandung nitrogen dengan bobot molekular berkisar antara 5.000 hingga 1.000.000 lebih dan meliputi kira-kira 50% berat kering sel. Fungsi dari protein adalah sebagai berikut: No Fungsi Jenis Contoh 1 Katalitik Enzim Katalase pepsin 2 Struktural Protein struktural Kolagen, elastin, keratin 3 Motil (mekanik Protein kontraktil Aktin, Myosin 4 Penyimpanan Protein angkutan Kasein (susu), ovalbumin (telur), feritin (penyimpan besi) 5 Pengangkutan Protein angkutan Albumin serum (asam lemak) hemoglobin (oksigen) 6 Pengatur Protein hormon enzim pengatur Insulin Fosfofruktokinasa 7 Perlindungan Antibodi Protein penggumpal Imun globulin Trombin, fibrinogen 8 Tanggap toksik Protein toksin Toksin bisa ular, toksin bakteri (bortulisme, difteri) • Protein merupakan polimer yang terdiri dari satuan asam amino yang terikat secara kovalen. • Hubungan kovalen dasarnya adalah suatu ikatan amida sederhana, yang dibentuk oleh kondensasi gugus amino suatu asam amino dengan gugus asam karboksilat lainnya. • Ikatan peptida ini diberi nama khusus: ikatan peptida. Kita dapat menggolongkan asam amino dengan menggunakan sifat fisik gugus rantai cabang pada pH 7, karena mendekati pH fisiologik. • Gugus rantai cabang asam amino hidrofobik, pada umumnya membentuk bagian dalam dari molekul protein globular apabila pelarut polar, air, dijauhkan. Alanin Valin Leusin Triptofan Metionin Isoleusin Prolin (suatu asam imino) Fenilalanin • Gugus rantai cabang asam amino polar yang tak bermuatan, dapat membentuk ikatan hidrogen. Rantai cabang polar, kecuali glisin, dapat juga disertakan dalam ikatan ion logam dengan melalui interaksi pasangan elektron bebas dari atom-atom O, N, atau S dari rantai cabang ion logamnya. Serin Glisin Threonin Sistein Asparagin Glutamin Tirosin • Gugus rantai cabang asam amino yang bermuatan positif atau negatif penuh, dapat mengadakan interaksi ionik dengan gugus bermuatan berlawanan, atau dengan gugus polar. • Rantai cabang bermuatan negatif Asam aspartat Asam glutamat • Rantai cabang bermuatan positif Arginin Lisin Histidin (terbanyak bermuatan positif pada pH 6) • Berikut ini adalah asam amino esensial bagi manusia: 1. Arginin* 2. histidin 3. isoleusin 4. leusin 5. lisin 6. metionin 7. fenilalanin 8. treonin 9. triptofan 10. valin (* hanya diperlukan oleh anak-anak yang sedang tumbuh) • Alanin mempunyai sifat-sifat fisik yang menunjukkan zat ionik, bahkan dalam keadaan padat. • Hal ini sesuai dengan kenyataan bahwa alanin murni ada dalam keadaan padat, dan pada batas pH tertentu terdapat bentuk ionik dwikutub yang dikenal sebagai zwitterion. • Zwitterion disebabkan karena adanya baik gugus pemberi proton (asam) ataupun gugus peneroma proton (basa) di dalam molekul asam amino. Protein kadang-kadang diperkenalkan sebagai molekulmakro pemberi keterangan, karena urutan asam amino dari protein tertentu mencerminkan keterangan genetic yang terkandung dalam urutan basa dari bagian yang bersangkutan dalam DNA yang mengarahkan biosintesa protein. Tiap jenis protein ditandai cirri-cirinya oleh: 1. Susunan kimia yang khas 2. Bobot molekular yang khas 3. Urutan asam amino yang khas Ada dua jenis protein, dibedakan oleh hasil-hasil yang diperoleh, apabila protein dihirolisasi manjadi satuan monomer penyusun. Ini adalah protein sederhana dan protein berkonjugasi: 1. Protein sederhana: hanya asam amino 2. Protein berkonjugasi: asam amino + gugus (-gugus) prostetik nonprotein. Bobot molekul protein berkisar dari suatu minimum sembarang dari kira-kira 5.000 sampai 1.000.000 lebih. Protein dengan bobot molekular kurang dari 5.000 sering ditunjukkan sebagai polieptida. Ada sejumlah kecil polipeptida yang penting dalam system hidup dan yang mempunyai sepuluh atau lebih sedikit satuan asam amino. Ini disebut oligopeptida (oligo, “beberapa”) Penggolongan protein menurut kelarutannya: 1. Protein berserat. Tidak larut dalam larutan garam dalam air 2. Protein berbentuk bola. Larut dalam larutan garam dalam air. Struktur protein digolongkan menjadi empat kelas: 1. Struktur primer 2. Struktur sekunder 3. Struktur tersier 4. Struktur kuarterner Diposkan oleh BIOLOGI ITU MUDAH di 01:42 Label: METABOLISME PROTEIN • anorganik, atau senyawa karbon yang memiliki satukarbon. •  • Senyawa karbon organik •  • membuat materi sel baruberkisar dari molekul sederhana seperti gula sederhana,asam organik, gula terikat alcohol, polimer rantai pendekdan rantai panjang mengandung karbon, hingga kepadasenyawa kompleks seperti karbohidrat, protein, lipid danasam nukleat (Gadd, 1988; Madigan et al., 2002). • A.1. Metabolisme Karbohidrat •  • Karbohidrat dan derivat : substrat utama untukmetabolism. •  • 2 peranan penting : •  • Karbohidrat dapat dioksidasi menjadi energi kimiayang tersedia di dalam sel dalam bentuk ATP dannukleotida • phosphopyridine • tereduksi •  • Karbohidrat menyediakan hampir semua karbon yangdiperlukan untuk asimilasi konstituen sel fungi yangmengandung karbohidrat, lipid, protein, dan asamnukleat. •  • Tahap awal : Tahap transfor, kecuali untuk di- atautrisakarida yang harus dihidrolisis terlebih dahulu di luarsel. •  • Transpor monosakarida melalui membran dilakukanoleh suatu protein transport spesifik, yaitu permease. • •  • Sebagian besar fungi dapat memanfaatkanmonosakarida, sedikit di-, oligo dan poli karena tidakmemiliki kemampuan untuk menghidrolisis molekul-molekul besar tersebut. Daftar pustaka AHMAD MUJIYARTO. “METABOLISME MIKROBIOLOGI(BAKTERI DAN FUNGI)” http://ahmadmujiyarto.wordpress.com/2010/08/23/metabolisme-mikrobiologibakteri-dan-fungi/.Posted on Agustus 23, 2010 Biologi Gonzaga.metabolisme protein. http://biologigonz.blogspot.com/2010/07/metabolisme-protein-2.html. Minggu, 25 Juli 2010